4-2- ریشه زایی…………………………………………………………………………………………………………………………………..14
فصل سوم
3- مواد و روش ………………………………………………….15
1-3- مکان و زمان انجام تحقیق………………………………………………………………………………………………………15
2-3- آماده سازی محیط کشت………………………………………………………………………………………………………15
1-2-3- محلول های ذخیره مواد معدنی محیط کشت MS……………………………………………………………………………………………………………..16
2-2-3- محلول های ذخیره مواد تنظیم کننده رشدی…………………………………………………………………………………………………………………….17
3-2-3- محلول ذخیره کیتوسان……………………………………………………………………………………………………..17
4-2-3- سایر مواد…………………………………………………………………………………………………………………………..17
3-3- ضدعفونی بذر……………………………………………………………………………………………………………..17
4-3- کاشت بذر و شرایط نگهداری ………………………………………………………………………………………………………18
5-3- تهیه ریزنمونه………………………………………………………………………….18
6-3- آزمایش1: تعیین اثر محیط کشت در جوانهزنی بذور گیاه مریمگلیکبیر ………………………………………………………………………………19
7-3- آزمایش2: بررسی اثر نوع ریزنمونه و محیط کشت بر القاء جوانه و باززایی شاخساره مریمگلیکبیر………………………………………19
8-3-آزمایش3: بررسی اثر نوع و ترکیبات هورمونی بر القاء جوانه و باززایی شاخساره مریمگلیکبیر………………………………………………20
9- 3- کاشت ریزنمونه…………………………………………………………………………………………………………………………………21
10-3- آزمایش 4: بررسی اثر غلظت نمک در محیط کشت پایه MS و تیمار هورمونی بر ریشهرایی شاخسارههای باززاشده مریمگلیکبیر ………………………………….21
11-3- صفات مورد ارزیابی …………………………………22
12-3- طرح آزمایشی و تجزیه آماری داده ها …………………………………………………………………………23
فصل چهارم
4- نتایج…………………………………………………………………………………………………………………24
1-4- آزمایش 1: جوانه زنی …………………………………………………………………………………………………24
1-1-4- اثر زمانهای مختلف ضدعفونی بر درصد و سرعت جوانهزنی …………………………………………………………………………………………….24
2-1-4- اثر محیطهای مختلف کشت بر درصد و سرعت جوانهزنی …………………………………………………………………………………………………25
3-1-4- اثر غلظتهای مختلف کیتوسان بر درصد و سرعت جوانهزنی ……………………………………………………………………………………………26
4-1-4- اثر سطوح مختلف pH بر درصد و سرعت جوانهزنی …………………………………………………………………………………………………………..27
2-4- القاء جوانه و باززایی مستقیم …………………………………………………………………………………………………28
3-4- آزمایش 2: بررسی اثر نوع ریزنمونه و محیط کشت بر القاء جوانه و باززایی شاخساره مریمگلیکبیر ……………………………………29
1-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه و محیط کشت بر القاء جوانه…………………………………………………………………………………………………………………30
1-1-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر القاء جوانه در محیط حاوی BAP ……………………………………………………………………………………………….30
2-1-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر القاء جوانه در محیط حاوی Kin …………………………………………………………………………………………………31
3-1-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر القاء جوانه در محیط حاوی TDZ………………………………………………………………………………………………..33
2-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه و محیط کشت بر باززایی شاخه……………………………………………………………………………………………………………..34
1-2-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر باززایی شاخه در محیط حاوی BAP ………………………………………………………………………………………….34
2-2-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر باززایی شاخه در محیط حاوی Kin …………………………………………………………………………………………….36
3-2-3-4- تأثیر نوع ریزنمونه بر باززایی شاخه در محیط حاوی TDZ ………………………………………………………………………………………….38
4-4- آزمایش 3: بررسی اثر نوع و ترکیبات هورمونی بر القاء جوانه و باززایی شاخساره مریمگلیکبیر …………………………………………39
1-4-4- اثر ترکیبات و غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر……………………………..40
2-4-4- اثر ترکیبات و غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر…………………44
3-4-4- اثر ترکیبات و غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد بر باززایی شاخه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر ……………………….48
4-4-4- اثر ترکیبات و غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد بر باززایی شاخه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر…………….52
5-4- آزمایش 4: بررسی اثر غلظت نمک در محیط کشت پایه MS و تیمار هورمونی بر ریشهزایی شاخسارههای باززاشده مریمگلیکبیر ……………………………………………………………………………………………………………………………………56
6-4- ………………………………………………………………………………………………………………….59
فصل پنجم
5- بحث…………………………………………………………………………………………………………………………60
1-5- جوانه زنی…………………………………………………………………………………………………………………….60
2-5- اثرات نوع ریزنمونه در باززایی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………61
3-5- اثرات نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد گیاهی بر باززایی…………………………………………………………………………………………………….64
4-5- اثرات ترکیبات مختلف تنظیمکنندههای رشد گیاهی بر ریشهزایی…………………………………………………………………………………………66
5-5- نتیجه گیری کلی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..68
6-5- پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………………………………..69
منابع………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….70
فهرست جداول
جدول1-3: ترکیب محلول های ذخیره پنج نمک غیر آلی در فرمولاسیون موراشیگ و اسکوگ (1962) ……………………….16
جدول 2-3: ترکیبات مختلف تنظیمکنندههای رشد گیاهی مورد استفاده در القای جوانه و باززایی شاخساره از ریزنمونه های مورد استفاده در مریم گلی کبیر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………20
جدول 1-4: درصد و سرعت جوانه زنی بذور مریم گلی کبیر در محیط های مختلف MS، WA وWFP……………………………………..25
جدول 2-4: اثر سطوح مختلف pH بر سرعت و درصد جوانه زنی بذور مریم گلی کبیر. ……………………………………………………………….28
جدول 3-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متفابل نوع ریزنمونه و BAP بر القاء جوانه در گیاه مریم گلی کبیر………………………………30
جدول 4-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع ریزنمونه و Kin بر القاء جوانه در گیاه مریم گلی کبیر…………………………….32
جدول 5-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع ریزنمونه و TDZ بر القاء جوانه در گیاه مریم گلی کبیر……………………………..33
جول 6-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع ریزنمونه و BAP بر باززایی شاخه در گیاه مریمگلیکبیر……………………………….35
جدول 7-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع ریزنمونه و Kin بر باززایی شاخه در گیاه مریمگلیکبیر………………………………37
جدول 8-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع ریزنمونه و TDZ بر باززایی شاخه در گیاه مریمگلیکبیر…………………………….38
جدول 9-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و BAP بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر………………………………………………………………………………………………………..39
جدول 10-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و Kin بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………….42
جدول 11-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و TDZ بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر………………………………………………………………………………………….43
12-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشدIAA و BAP بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر………………………………………………………………………………………………………45
جدول 13-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و Kin بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر………………………………………………………………………………………………………46
جدول 14-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و TDZ بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….48
جدول 15-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و BAP بر باززایی شاخه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….49
جدول 16-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و Kin بر باززایی شاخه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….50
جدول 17-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و TDZ بر باززایی شاخه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….51
جدول 18-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و BAP بر باززایی شاخه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………53
جدول 19-4- جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و Kin بر باززایی شاخه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………54
جدول 20-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل نوع و غلظت تنظیمکنندههای رشد IAA و TDZ بر باززایی شاخه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………56
جدول 21-4: جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل غلظت نمک در محیط کشت پایه MS و تیمار هورمونی بر میانگین تعداد ریشه و طول ریشه در گیاه مریمگلیکبیر ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….57
فهرست اشکال
شکل 1-3: ریزنمونه های تهیه شده از گیاهچه های حاصل از کشت بذور ضدعفونی شده در شرایط استریل………………………………..19
شکل 1-4: اثر غلظتهای مختلف کیتوسان بر رنگ برگ و اندازه طول گیاهچههای مریمگلیکبیر در محیط پایه MS ………………27
شکل 2-4: ریزنمونههای هیپوکوتیل و کوتیلدون مریمگلیکبیر قرارگرفته در محیط باززایی که پس از حدود یک ماه، سیاه شده و از بین رفتند…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………28
شکل 3-4: القاء جوانه و باززایی شاخساره در ریزنمونه گره در محیط کشت MS حاوی تنظیمکنندههای رشد…………………………….29
شکل 4-4: ریشه زایی و سازگاری. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………59
فهرست نمودارها
نمودار 1-4: اثر زمان های مختلف استریلیزاسیون بر سرعت و درصد جوانه زنی در بذور مریمگلیکبی…………………………………………25
نمودار 2-4: اثر غلظتهای مختلف کیتوسان بر سرعت و درصد جوانهزنی بذور مریمگلیکبیر ……………………………………………………26
نمودار 3-4: پاسخ نوع ریزنمونه مریمگلیکبیر بر میانگین تعداد جوانه القا شده در محیط MS حاوی غلظتهای مختلف BAP..31
نمودار 4-4: اثر غلظتهای مختلف BAP بر میانگین القاء جوانه در گیاه مریمگلیکبیر در محیط MS ……………………………………….31
نمودار 5-4: مقایسه میانگینهای برشدهی اثر متقابل نوع ریزنمونه و تیمار هورمونی Kin بر القاء جوانه در گیاه مریمگلیکبیر…32
نمودار 6-4: مقایسه میانگین اثر نوع ریزنمونه مریمگلیکبیر بر میانگین تعداد جوانه القا شده در محیط MS حاوی غلظت های مختلف TDZ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..34
نمودار 7-4: مقایسه میانگین اثر غلظتهای مختلف TDZ بر القاء جوانه در گیاه مریمگلیکبیر ……………………………………………………34
نمودار 8-4: مقایسه میانگین اثر نوع ریزنمونه مریمگلیکبیر بر میانگین شاخه باززایی شده در محیط MS حاوی غلظتهای مختلف BAP ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..35
نمودار 9-4: مقایسه میانگین اثر غلظتهای مختلف BAP بر باززایی شاخه در گیاه مریمگلیکبیر ……………………………………………..36
نمودار 10-4: مقایسه میانگینهای برشدهی اثر متقابل نوع ریزنمونه و Kin بر باززایی شاخه در گیاه مریمگلیکبیر…………………..37
نمودار 11-4: مقایسه میانگین اثر نوع ریزنمونه بر میانگین شاخه باززایی شده مریمگلیکبیر در محیط MS حاوی غلظتهای مختلف TDZ ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..39
نمودار 12-4: مقایسه میانگین اثر غلظتهای مختلف TDZ بر باززایی شاخه مریمگلیکبیر در محیط MS ………………………………..39
نمودار 13-4: مقایسه میانگین اثر ساده غلظتهای مختلف هورمون BAP بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر………………41
نمودار 14-4: مقایسه میانگینهای برشدهی اثر متقابل غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد Kin و IAA بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………42
نمودار 15-4: مقایسه میانگینهای برشدهی اثر متقابل غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد TDZ و IAA بر القاء جوانه از ریزنمونه گره مریمگلیکبیر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………44
نمودار 16-4: مقایسه میانگینهای برشدهی اثر متقابل غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد BAP و IAA بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..45
نمودار 17-4: مقایسه میانگین اثر ساده غلظتهای مختلف Kin بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر…………………..47
نمودار 18-4: مقایسه میانگین اثر ساده غلظتهای مختلف IAA بر القاء جوانه از ریزنمونه نوک شاخه مریمگلیکبیر…………………47
[سه شنبه 1399-10-09] [ 05:51:00 ق.ظ ]
|