2-8- کاربرد اصلی نشانگرهای مولکولی در مطالعات اکولوژیکی حشرات———- 18

 

2-8-1- برهم‌کنش حشرات و گیاهان میزبان-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 19

 

2-8-2- برهم کنش حشرات و پاتوژن‌ها-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد———- 21

 

2-8-3- مقاوت به حشره‌کش‌ها—– 22

 

2-8-4- روابط شکار- شکارگر- پارازیتوئید-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—— 23

 

2-8-5- سیستماتیک مولکولی—– 24

 

2-8-6- حشرات تراریخته———- 25

 

2-9- میکروستلایت‌ها یا توالی‌های ساده تکرار شونده———— 26

 

2-10- نشانگر ISSR و کاربرد آن در مطالعات گیاهی و جانوری— 30

 

2-11- منابع تغییرات و چند شکلی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————– 31

 

2-11-1- نمونه DNA————— 32

 

2-11-2- طبیعت آغازگرهای مورد استفاده:-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 32

 

2-11-3- روش کشف————— 33

 

2-12- کاربردهای تکنیک ISSR—- 34

 

2-12-1- انگشت‌نگاری ژنتیکی—- 34

 

2-12-2- تنوع ژنتیکی و آنالیز فیلوژنتیکی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—— 34

 

2-12-3- نقشه‌یابی ژنتیکی——– 34

 

2-12-4- تعیین فراوانی توالی‌های ساده تکراری (SSR)———- 35

 

2-12-5- مطالعه جمعیت‌های طبیعی و گونه‌زایی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد 35

 

2-13- چشم انداز کاربرد ISSR در ژنتیک مولکولی————— 36

 

2-14- کاربرد نشانگر ISSR در حشره شناسی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 37

 

2-15- نشانگرهای DNA مبتنی بر واکنش زنجیره‌ای پلیمراز—– 38

 

فصل سوم

 

مواد و روش‌ها——– 40

 

3-1- جمع آوری نمونه‌ها———— 41

 

3-2- استخراج DNA زنبور عسل— 43

 

3-3- تعیین کیفیت DNA استخراج شده-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——– 45

 

3-3-1- الکتروفورز DNA در ژل آگارز 1 درصد-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– 45

 

3-3-2- بررسی غلظت DNA استخراج شده-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—– 46

 

3-3-3- رقیق سازی DNA استخراجی برای دستیابی به غلظت  ng/µl25—— 47

 

3-4- واکنش زنجیره‌ای پلیمراز—– 47

 

3-5- الکتروفورز محصول PCR روی ژل آگارز-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 49

 

3-6- نمره دهی باندهای مشاهده شده روی آگارز نشانگر غالب ISSR———— 50

 

3-7- ورود داده‌های حاصل از ژل‌ها به نرم افزار اکسل————- 51

 

3-8- اندازه گیری فواصل و تشابه‌های ژنتیکی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- 54

 

3-9- روش های گروهبندی داده ها-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————— 55

 

3-10- تجزیه خوشه ای————- 56

 

3-11- نیکویی برازش خوشه بندی یا ضریب کوفنتیک———– 56

 

3-12- تجزیه به مولفه های اصلی— 57

 

3-13- آنالیز داده‌های مولکولی—– 58

 

3-14- بررسی‌های مورفولوژیکی—- 58

 

 

3-15- تجزیه به مؤلفه اصلی——– 60

 

3-16- آنالیز داده‌های مورفولوژیکی-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————– 61

 

فصل چهارم

 

نتایج—————– 62

 

بررسی تنوع مرفولوژیکی نژادهای زنبور عسل مورد مطالعه——– 63

 

4-2- نتایج مربوط به هفت صفت ظاهری اندازه‌گیری شده روی زنبوران عسل پنج استان ایرانبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد- 63

 

4-3- همبستگی خصوصیات ظاهری زنبور عسل پنج استان ایران—————- 64

 

4-4- ماتریس‌های شباهت و تفاوت بین زنبورهای پنج استان مختلف ایران—— 65

 

4-5- تجزیه خوشه‌ای و تجزیه به مولفه‌های اصلی بر اساس داده‌های مرفومتریکبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————— 66

 

4-6- بررسی تنوع ژنتیکی نژادهای زنبور عسل مورد مطالعه—— 67

 

4-7- تعداد باندهای تولیدی هر آغازگر برای زنبورهای استان‌های مورد مطالعه– 72

 

4-8- تعداد باندهای تولیدی در هر نژاد زنبور عسل—————- 72

 

4-9- تعداد باندهای تولید هر آغازگر و کارایی آنها در تکثیر—— 73

 

4-10- ماتریس‌های شباهت و تفاوت بین زنبورهای پنج استان مختلف ایران—- 74

 

4-11- تجزیه خوشه‌ای و تجزیه به مولفه‌های اصلی بر اساس داده‌های مولكولی– 74

 

4-12- بررسی شاخص نشانگری و قدرت تمایز آغازگرهای مورد مطالعه روی زنبور عسلبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——- 76

 

4-13- تعداد کل جایگاه‌های ژنی و تعداد جایگاه‌های ژنی  چندشکل در زنبورهای مورد مطالعهبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد- 77

 

4-14- دندوگرام اجماعی حاصل از داده‌های ژنتیکی و مرفومتریک————— 78

 

فصل پنجم

 

بحث و نتیجه‌گیری— 79

 

چگونگی کاربرد و آنالیز نشانگر ISSR در تنوع ژنتیکی زنبور عسل- 81

 

بررسی تنوع ژنتیکی نژادهای زنبورعسل مورد مطالعه————- 87

 

پیشنهادات:———- 90

 

منابع—————– 91

 

فهرست جداول

 

جدول 2-1: نام‌های متفاوت و همنام تکنیک ISSR-PCR- 31

 

جدول3-1: مکان‌ و آدرس‌های محل نمونه برداری زنبور عسل- 42

 

جدول 3-2 مواد واكنش، ‌حجم و غلظت نهایی اجزای واكنش زنجیره پلیمراز 48

 

جدول3-3: صفات مرفولوژیک اندازه‌گیری شده 59

 

جدول 4-1: میانگین هفت صفت مرفولوژیک زنبوران کارگر مورد مطالعه- 63

 

جدول4-2: اندازه هفت صفت مرفولوژیک زنبور عسل پنج استان ایران- 64

 

جدول 4-3: همبستگی بین صفات ظاهری اندازه‌گیری شده در زنبور عسل- 65

 

جدول 4-4: ضریب فاصله مرفولوژیکی  و تشابه مرفولوژیکی بین پنج جمعیت زنبور عسل- 65

 

جدول 4-5: لیست آغازگرها، توالی آنها و چند شكلی مشاهده شده در نژادهای زنبور عسل- 68

 

جدول 4-6: تعداد باندهای تولیدی هر آغازگر برای زنبورهای استان‌های مورد مطالعه- 72

 

جدول 4-7: ضریب تشابه ژنتیکی و فاصله ژنتیکی بین پنج جمعیت زنبور عسل  بر اساس نشانگر ISSR- 74

 

جدول 4-8: میزان برخی شاخص‌های آغازگرهای مورد استفاده در مطالعه تنوع ژنتیکی زنبور عسل- 76

 

فهرست اشکال

 

شکل 2-1: نقاشی کشف شده از زنبورداری در والنسیای اسپانیا 6

 

شکل 2-2: طبقه بندی انواع نشانگرهای ژنتیکی- 17

 

شکل3-1: پنج استان جمع آوری نمونه‌ی زنبور عسل- 41

 

شکل3-2: نمایی از مکان‌های جمع آوری نمونه‌های زنبور عسل- 42

 

شکل 3-3: دستگاه حمام آب مورد استفاده در این آزمایشات– 43

 

شکل 3-4: دستگاه سانتریفیوژ مورد استفاده در این آزمایشات– 44

 

شکل 3-5: بررسی کیفیت DNA استخراج شده ژنومی روی ژل آگارز 1 درصد- 46

 

شکل 3-6: دستگاه نانودراپ اسپکتروفوتومتر مورد استفاده در تعیین غلظت DNA- 47

 

شکل 3-7: برنامه واكنش زنجیره‌ای پلیمراز 49

 

شکل 3-8: دستگاه‌های PCR مورد استفاده در این آزمایشات– 49

 

شکل 3-9: تانک‌ الکتروفورز ژل آگارز مورد استفاده در این آزمایشات– 50

 

شکل 3-10: دستگاه BioDoc Analyzer و سیستم تصویربرداری از ژل آگارز 50

 

شکل 3-11: باندهای موجود و نمره‌دهی لوکوس‌های موجود حاصل از تصویربرداری ژل‌های آگارز نشانگر ISSR- 51

 

شکل 3-12: ورود داده‌های حاصل از نمره‌دهی ژل‌های آگارز به نرم افزار اکسل جهت آنالیز- 51

 

شکل 3-13: نمایی از بال جلویی زنبور عسل و صفات اندازه‌گیری شده 60

 

شکل 3-14: دستگاه استریومیکروسکوپ مجهز به دوربین مورد استفاده در آزمایشات– 60

 

شکل 4-1: دندروگرام حاصل از آنالیز خوشه‌ای بر اساس روش UPGMA با ماتریس تشابهCorr   66

 

شکل 4-2: مقایسه زنبورهای عسل مورد بررسی با استفاده از روش تجزیه به مولفه‌های اصلی- 67

 

شکل 4-3: تصاویر ژل آگارز 5/1 درصد آغازگر 1  با استفاده از مارکر bp 50- 69

 

شکل 4-4: تصاویر ژل آگارز 5/1 درصد آغازگر 2 با استفاده از مارکر bp 50- 70

 

شکل 4-5: تصاویر ژل آگارز 5/1 درصد آغازگر 3 با استفاده از مارکر bp 50- 70

 

شکل 4-6: تصاویر ژل آگارز 5/1 درصد آغازگر 4 با استفاده از مارکر bp 50- 71

 

شکل 4-7: تصاویر ژل آگارز 5/1 درصد آغازگر 5 با استفاده از مارکر bp 50- 71

 

شکل 4-8: تعداد باندهای تولیدی در نژادهای زنبور عسل- 73