1-4-3- سئوالات تحقیق 6

 

1-5- روش تحقیق و پژوهش 7

 

انگل‌ها و بیماری‌های طیور و سایر پرندگان 9

 

2-1- انگلهای خارجی 9

 

2-1-1- ساسها 9

 

2-1-2- شپشهای گزنده 9

 

2-1-3- مگسهای سیاه 10

 

2-1-4- مایت‌های ماکیان 10

 

2-1-5- لارومایت ها 10

 

2-1-6- سوسک بستر و لارو آن آلفیتوبیوس دپاپرینوس 11

 

2-1-7- مایت‌های پر و مایت‌های ایجادکننده پرریزی 11

 

2-1-8- مایت‌های زیر پوستی 11

 

2-2- انگل‌های داخلی 12

 

2-2-1- کیسه ملتحمه 12

 

2-2-2- نای 13

 

2-2-4- پیش معده 14

 

2-2-5- سنگدان 14

 

2-2-6- روده باریک 15

 

2-2-7- روده کور 16

 

2-2-8- پوست 17

 

2-3- بیماری‌های انگلی طیور 17

 

2-3-1- کوکسیدیوز 17

 

2-3-2- کریپتوسپوریدیوز 20

 

2-3-3- هگزامیتیازیس 24

 

2-3-4- هیستومونیازیس 27

 

2-3-5- لکوسیتوزئونوز 32

 

2-4- واکنش زنجیر‌های پلی مراز( PCR ) 35

 

2-4-1- مواد و وسایل لازم برای انجام برای انجام آزمایش PCR 36

 

2-4-2- سنتز 36

 

2-4-3- تشخیص و تجزیه فراورده‌های PCR: 37

 

3-1- نمونه گیری 40

 

3-2- استخراج DNA از کبد با استفاده از کیت 40

 

3-3- استخراج DNA از خون با استفاده از کیت 41

 

3-4- آزمایش PCR 42

 

3-4-1- روش کار 42

 

3-5- تهیه ژل آگارز 43

 

3-5-1- مواد و وسایل لازم 43

 

3-5-2- روش تهیه بافر (1X) TBEبرای تهیه ژل آگارز 44

 

3-5-3- روش تهیه ژل آگارز 44

 

3-5-4- روش انجام الکتروفورز 44

 

 

3-5-5- آنالیز محصول PCR: 45

 

3-6- آزمایشات هیستوپاتولوژی 45

 

3-6-1- رنگ آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین (H&E) : 45

 

3-6-2- روش رنگ آمیزی اسلاید با رنگ (H&E) : 46

 

3-6-3- تفسیر رنگ آمیزی (H&E) 47

 

3-6-4- نتایج رنگ آمیزی (H&E) 48

 

4-1- نتایج کیفی مربوط به استخراج DNA 50

 

4-2- نتایج آزمایشات هیستوپاتولوژی 51

 

 

 

 

 

 

 

5-1- بحث 53

 

5-2- پیشنهادات 56

 

منابع 57

 

 

 

 

 

فهرست شکل‌ها

 

عنوان                                             صفحه

 

 

 

شکل 4-1- الکتروفورز محصولات PCR به منظور تکثیر ژن انگل هیستومونیازیس در نمونه‌های خون و کبد بوقلمون بر روی ژل آگارز 1%. 50

 

شکل 4-2- مشاهده مقاطع انگل هیستوموناد در بین هپاتوسیت‌های کبدی. 51

 

 

 

فهرست جداول

 

عنوان                                             صفحه

 

 

 

جدول 4-1- مقایسه روش ردیابی از طریق PCR و آزمایشات هیستوپاتولوژی 51

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

چکیده

 

به منظور ردیابی هیستوموناس مله اگریدیس در بوقلمون‌های کشتار شده در استان اصفهان، 200 نمونه خون و 200 نمونه کبد در کشتارگاه اخذ شد و پس از استخراج DNA، قطعه 550 جفت بازی مربوط به ژن 18SRNA تکثیر شد. علاوه بر آن، نمونه‌های کبد در فرمالین 10% نگهداری و پس از تهیه مقاطع پاتولوژی رنگ آمیزی با هماتوکسیلین – ائوزین از نظر وجود انگل مورد بررسی قرار گرفت. نتایج PCR نشان داد از 200 نمونه خون، 18 نمونه (9%) و از تعداد 200 نمونه کبد، 32 نمونه (16%) از لحاظ هیستوموناس مله اگریدیس مثبت می‌باشد. نتایج هیستوپاتولوژی نشان داد از بین نمونه‌های PCR مثبت 76/11 % در هیستوپاتولوژی مثبت ارزیابی شدند لذا به نظر می‌رسد برای شناسایی هیستوموناس مله اگریدیس PCR از ویژگی بالایی برخوردار می‌باشد.

 

 

 

کلید واژه‌ها : بوقلمون، هیستوموناس مله اگریدیس، PCR، اصفهان.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فصل اول