كلید واژه ها: باززایی مستقیم، بذرالبنج مشبک، تنظیمکننده رشد گیاه، ریزنمونه، کشت درونشیشهای
Email: b.hosseini@urmia.ac.ir نویسنده مسئول *
مقدمه
گیاههان ج نس Hyoscyamus از جمل ه گیاههان داروی ی باارزش، متعلق به تیره Solanaceae و دارای 20 گونه و 90جنس در سطح جهان و نیز 13 گونه در ایران میباشهد کهه هفت گونه آن بومی هستند [1، 6]. گونه بهذرالبنج مشهب )با نام علمهی Hyoscyamus reticulatus L.( بهوم ی منهاطق اروپا، علفی، دوساله بوده و دارای ترکیبهات دارویهی نظیهر تروپان آلکالوئیدهای هیوسیامین و اسکوپولامین میباشد که از آن ها در تهیه داروهای ضدتشنج، بی حسی، مسکن و تب بهر استفاده می شود [7،3، 21 و 26]. میه زان آلکالوئیه دهای کهل در H. reticulatus در بههرگههها 027/0-011/0 و در ریشهههههها
417/0 درصد مشاهده شد. سایر متابولیتهای شهناخته شهده در گونههای بذرالبنج شامل فلاونوئیه دها، اسهید کلروژنیه ، تانن و کومارین میباشند [5، 16 و 19].
فاکتورهای شیمیایی، مواد معدنی، تنظیمکنندههای رشهد به عنوان مهمترین عوامل در تمایززدایی و رشد گیاه مؤثرند [23]. تحقیقات متعددی بر روی باززایی گیاهان متعلهق بهه ای ن تیههره نظیههر [ Solanum ،[14Hyoscyamus niger
[ Solanum melongena L. ] ،[13trilobatum L.18]، در محی کشت حهاوی ترکیبهات و سهطوح مختلهف تنظهیم -کننده های رشدی و ریزنمونههای مختلف انجام شده است.
در یکی از گونههای گیاه مریمگلی )با نام علمی Salviamiltiorhizza(، بیشترین نرخ باززایی غیرمستقیم در محه ی کشت MS حاوی 5/0 میلیگرم در لیتر IAA و 6/4 میله ی–گرم در لیتر Kin و باززایی مسهتق یم در محه ی کشهت MS حاوی 6/2 میلیگرم در لیتر BA و 5/0 می لهیگهرم در لیتهر IAA بهدست آمد [28]. در گیاه نعناع فلفلی )با نهام علمهی Mentha piperita(، حداکثر تعداد شاخه و طول شهاخه درمحی کشت MS حاوی 4/0 میلیگرم در لیتر NAA و 4/0 میلیگرم در لیتر Kin بهدست آمد [29]. انهدام زایهی درون–شیشهای از گیه اه .Cassia auriculata L در محه ی کشهت MS حاوی سه میلیگرم در لیتر BA و یه میله یگهرم در لیتر NAA و محی کشت MS حاوی سه میلیگرم در لیتهر Kin و سه میلیگرم در لیتر BA صورت گرفت [27].
باتوجه به اهمیت این گیاه و نیز درنظر گرفتن این نکته که هیچ مطالعهای در مورد کشت درونشیشهه ای ایهن گیهاه تاکنون گزارش نشده است، هدف از انجام پژوهش حاضر، شناخت بهترین، سریعترین و اقتصادیترین روش تکثیهر و دستیابی به محی کشت مناسهب بهرای بهاززایی و تکثیهر گیاه درونشیشهای این گیاه و همچنین تدوین دانهش فهن -کشت درونشیشهای در ایران میباشد.
مواد و روشها
مواد گیاهی، ضدعفونی سطحی و شرایط نگهداری بذر موردنیاز جهت کشت درونشیشهای در شرای گنهدزدا به منظور تهیه ریزنمونه سالم و تمیز از باغ گیاهان دارویهی دانشکده کشاورزی دانشگاه ارومیه تهیه ه گردیهد . همچنهین تحقیق در مرکز رشهد واحهدها ی فنهاور ی و بیوتکنولهوژ ی جهاد دانشگاهی ارومیه در سال 1392 انجهام گردیه د. ابتهدا جهت شکستن خهواب فیزیولهوژیکی بهذور بهه مهدت 24 س اعت در ش رای ک املا ت اریکی و در دم ای 24 درج ه سانتیگراد با محلول جیبرلین آغشته گردید. سهپس جههت ضدعفونی سطحی بذرها از اسیدسولفوری 10 درصهد بهه مدت هفت دقیقه، هیپوکلریت سدیم پنج درصهد بهه مهدت 10 دقیقه و سه بار غوطهه وری در آب مقطهر بهه مهدت 10 دقیقه اسهتفاده گردیه د. پهس از ضهدعفون ی سهطح ی بهذور استریل در محی کشت پایه MS تکمیل شده با ساکارز سه درصد حجمی و آگار 8/0 درصهد بها اسهیدیته 7/5 کشهت شدند. جهت کشت کلیه مواد گیاهی در اتاق رشد با دمها ی 2 ± 24 درجههه سههانتیگههراد و بهها فتوپریههود 16 سههاعتروشنایی و هشت سهاعت تهار یکی قهرار گرفتنهد . قطعهات هیپوکوتیههل و کوتیلههدون 15 روز پههس از کشههت بههذر و قطعات گره و نوک شهاخه 21 روز پهس از کشهت بهذر از گیاهچههای حاصل تهیه شدند.
آزمایش بررسی اثر ترکیبات و غلظتهای مختلف تنظیمکنندههای رشد بر باززایی
این آزمایش به منظور بررسی اثهر ترکیبهات و غلظهت ههای
جدول 1. تركیبات مختلف تنظیمكننده رشد گیاهی جهت مطالعه باززایی گیاه بذرالبنج مشبک در شرایط درونشیشه
|
مختلف تنظیمکنندهههای رشهد گیهاهی بهر میهزان بهاززایی ریزنمونههای کوتیلدن، هیپوکوتیل، گره و نوک شاخساره بهصورت فاکتوریل در قالب طرح کهاملا تصهادفی بها چههار تکرار انجام گردیهد . فاکتورههای آزمایشهی شهامل ترکیهب هورمون IAA در سه سطح )صفر، 1/0 و 5/0 میلیگهرم در لیتر( با Kin در چهار سطح )صفر، ی، سه و پنج میلیگرم در لیتر( بودند )جدول 1(. واکشهت ریزنمونهه هها ههر سهه هفته ی بار انجام گردید و پس از سه بار واکشهت ، میهزان القای جوانه و تعداد شاخههای باززایی شده در هر تیمار و در هر تکرار محاسبه گردید.
آزمایش بررسی اثر نوع محیط کشت پایه و غلظفت IBA و IAA بر ریشهزایی
این آزمایش به منظور بررسی تأثیر غلظهت نمه )MS( و هورمون های IAA و IBA بر میزان ریشهزایی گیاهچهههای باززایی شده در آزمایشگاه انجام گرفت. تیمارهای آزمایشی شامل محی کشهت 2 MS/ 1و MS در غلظهت ههای 1/1 و 2/2 میکرومولار IAA و IBA بودند. همچنین محی کشت
2 MS/ 1و MS فاقد هورمون به عنهوان تیمهار شهاهد مهورد آزمایش قرار گرفت. آزمایش به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی در چهار تکهرار صهورت پهذیرفت . در پایان واکشتها میانگین القای ریشهه حاصهله انهدازه گیهری گردید.
سازگاری
گیاهچههای ریشه دار شده به داخل گلدانهای پلاستیکی بها بستری از پیت و پرلیت به نسبت )3 به 1( تغذیهه شهده بها محلول MS½ منتقل شهدند . بهرای حفه رطوبهت نسهبی ، گلدانها در جعبه پلاستیکی شفاف قهرار گرفتهه و در اتهاق رش د نگههداری ش دند. بع د از 21 روز، درپ وش جعب ه پلاستیکی بهتدریج باز و گیاهچههای سازگار شده نهایتا بهه گلخانه منتقل شدند.
روش تجزیه آماری
تجزیه آماری دادهها با استفاده از نرمافهزار آمهاری SPSS و مقایسه میانگینها با آزمون چنددامنهای دانکهن )DMRT( انجام و نمودارها با استفاده از نرمافزار Excel رسم شد.
نتایج و بحث
اثر غلظتهفای مختلف Kin و IAA بفر میفانگی القای جوانه
نتایج جدول تجزیه واریانس نشهان داد کهه اثهر متقابهل در ریزنمون هه ای کوتیل دن، هیپوکوتی ل و گ ره در ترکیب ات مختلف هورمونی و در ریزنمونه نوک شاخساره اثهر سهاده کینتین بر میانگین القای جوانه در سطح احتمال ی درصهد معنیدار بوده است )جدولههای 2 و 3(. براسهاس مقایسهه میانگینههای انجهام شهده طبهق آزمهون دانکهن ، بیشهترین میانگین القای جوانه )50/32 و 31 جوانه در هر ریزنمونهه( در ریزنمونه کوتیلدن بهترتیب در محی کشت حاوی یه میلیگرم در لیتر Kin و 1/0 میلیگرم در لیتهر IAA و پهنج میلیگرم در لیتر Kin و 5/0 میلیگرم در لیتر IAA بهدسهت آمد. در ریزنمونه هیپوکوتیل حداکثر القهای جوانهه )63/31 و31/31 جوانه در هر ریزنمونه ( به ترتیب در محهی کشهت MS حاوی سه میلیگرم در لیتر Kin و 1/0 میلیگرم در لیتهر IAA و پنج میلیگرم در لیتر Kin و 5/0 میلهی گهرم مشهاهده گردی د و در ریزنمون ه گ ره ب الاترین مق دار الق ای جوان ه )31/37 جوانه در هر ریزنمونه( در محی کشت MS تکمیل شده با ی میلیگرم در لیتهر Kin و 1/0 میلهی گهرم در لیتهر IAA بهدست آمد. همچنین در ریزنمونه نهوک شاخسهاره در همه تیمارها، القای جوانه مشاهده گردید که تفهاوت معنهی -داری با تیمار شاهد نشان دادند )شکلهای 1، 2، 3 و 4(.
جدول 2. نتایج تجزیه واریانس اثر تركیب تنظیمكننده رشد Kin و IAA بر میانگین القای جوانه از ریزنمونههای كوتیلدن،
هیپوكوتیل، گره و نوک شاخساره گیاه بذرالینج مشبک1
کوتیلدن هیپوکوتیل نوک شاخساره
1056/553* 1186/014** 1664/755** 1581/192** 3 Kin
264/228ns 67/030* 232/658** 248/371** 2 IAA
ns 192/405** 63/406** 177/635** 6 IAA × BAP 197/130 اشتباه آزمایشی 36 38/1 770/3 567/28 567/28
** – معنیدار بودن در سطح احتمال 1 درصد، * – معنیدار بودن در سطح احتمال 5 درصد، ns – عدم معنیدار بودن
جدول 3. جدول تجزیه واریانس اثرات نوع ریزنمونهKin بر میانگین القای جوانه در بذرالبنج مشبک
میانگین مربعات | درجه آزادی | منابع تغییرات |
1474/968** | 3 | ریزنمونه |
4514/110** | 3 | Kin |
1022/620* | 2 | اکسین |
251/725** | 9 | ریزنمونه × Kin |
71/698* | 6 | ریزنمونه × اکسین |
169/663* | 6 | Kin × اکسین |
147/752** | 18 | Kin × اکسین × ریزنمونه |
54/820 | 141 | اشتباه آزمایشی |
28/46 | ضریب تغییرات )%( |
* و ** – بهترتیب نشاندهنده اختلاف معنیدار در سطوح ی و پنج درصد میباشد.
شکل 1. تأثیر تركیبات و غلظتهای مختلف Kin و IAA بر میانگین القا جوانه و باززایی شاخه در ریزنمونه كوتیلدن گیاه بذرالبنج مشبک. حروف غیرمشابه نشاندهنده تفاوت معنیدار در سطح احتمال 1 درصد بین میانگین ها در آزمون دانکن میباشد.
شکل 2. تأثیر تركیبات و غلظتهای مختلف Kin و IAA بر میانگین القای جوانه و باززایی شاخه در ریزنمونه هیپوكوتیل گیاه بذرالبنج مشبک. حروف غیرمشابه نشاندهنده تفاوت معنیدار در سطح احتمال 1 درصد در بین میانگینها در آزمون دانکن می باشند.
شکل 3. تأثیر تركیبات و غلظتهای مختلف Kin و IAA بر میانگین القای جوانه و باززایی شاخه در ریزنمونه گره گیاه بذرالبنج مشبک. حروف غیرمشابه نشاندهنده تفاوت معنیدار در سطح احتمال 1 درصد در بین میانگینها در آزمون دانکن میباشند.
اثر غلظتهای مختلف Kin و IAA بر باززایی شاخه نت ایج آن الیز واری انس دادهه ا نش ان داد ک ه اث ر متقاب ل ریزنمونههای کوتیلدن، هیپوکوتیل و گره در کینتین، ایندول استی اسید و در ریزنمونه نوک شاخساره اثر ساده کینتهین بر میانگین باززایی شهاخه در سهطح احتمهال یه درصهد معنیدار بوده است )جدولههای 4 و 5(. براسهاس مقایسهه میانگینهای انجام شده طبق آزمون دانکن، حداکثر میانگین باززایی شاخه در ریزنمونه کوتیلدن در محی کشت حاوی 1 میلیگرم در لیتر Kin و 1/0 میلیگرم در لیتر IAA )131 گیاهچه در هر تیمار( و پنج میلهی گهرم در لیتهر Kin و 5/0 میلیگهرم در لیتهر IAA )124 گیاهچهه در ههر تیمهار( ، در ریزنمونه هیپوکوتیل در محی کشت حاوی 3 میلیگهرم در لیتر Kin و 1/0 میلیگرم در لیتر IAA )50/126 گیاهچه در هر تیمار( و پنج میلیگرم در لیتر Kin و 5/0 میلهی گهرم در لیتر )25/133 گیاهچه در ههر تیمهار( ، در ریزنمونهه گهره در محی کشت تکمیل شده با ی میلیگرم در لیتهر Kin و 1/0 میل یگ رم در لیت ر IAA )25/149 گیاهچ ه در ه ر تیم ار( مشاهده گردید )شکلهای 1، 2 و 3(. همچنین در ریزنمونهه نوک شاخساره در همه تیمارها باززایی شاخه مشاهده گردید که تفاوت معنیداری با تیمار شاهد داشتند )شکل 4(.
شکل 4. اثر سیتوكنین بر باززایی ریزنمونه نوک شاخساره گیاه بذرالبنج مشبک
جدول 4. جدول تجزیه واریانس اثر تركیب تنظیمكننده رشد Kin و IAA بر میانگین باززایی شاخه از ریزنمونههای كوتیلدن، هیپوكوتیل، گره و نوک شاخساره
نوک شاخساره
21690/444** 18144/243 26636/076** 25314/243** 3 Kin
3030/146ns 1140/646ns 3722/521** 4020/771** 2 IAA
ns 3697/451** 1014/493** 2891/326** 6 IAA × BAP257/1394 خطای آزمایشی 36 563/25 326/60 229/408 569/835
** – اختلاف معنیدار در سطح احتمال 1 درصد، ns – عدم وجود اختلاف معنیدار
میانگین مربعات )MS( | درجه آزادی | منابع تغییرات |
21148/253 ** | 3 | ریزنمونه |
76669/729** | 3 | Kin |
14810/828** | 2 | اکسین |
229/706** | 9 | ریزنمونه × Kin |
1253/793* | 6 | ریزنمونه × اکسین |
2825/224** | 6 | Kin × اکسین |
2324/846** | 18 | Kin × اکسین × ریزنمونه |
820/55 | 141 | اشتباه آزمایشی |
21/75 | ضریب تغییرات )%( |
جدول 5. تجزیه واریانس اثرات نوع ریزنمونه و Kin بر میانگین باززایی شاخه در بذرالبنج مشبک
* و ** – به ترتیب نشاندهنده اختلاف معنیدار در سطوح پنج و ی درصد میباشد.
در تیمار شاهد ریزنمونهه ههای کوتیلهدن و هیپوکوتیهل باززایی شاخه و القای جوانه صهورت نگرفهت و در تیمهار شاهد ریزنمونههای گره و نوک شاخساره کمترین میهانگین القای جوانه و باززایی شاخه مشاهده گردید.
تکثیر درونشیشهای به وسیله فاکتورهای متعددی تحت تأثیر قرار میگیرد، یکی از فاکتورههای بسهیار مههم نهوع و غلظت و نسبت تنظیمکنندههای رشد اضافه شده به محهی کشت میباشد که در کشت درونشیشهای جهت تسریع در رشد استفاده میشود [20]. به عنوان ی قاعده کلی جههت انجام هرچه بهتر رشد، اکسین یا سیتوکنین و یها ههر دو بها هم به محی کشت افزوده میشوند [7]، ولی نسبت مناسب اکسین به سیتوکنین به نوع گونه و ریزنمونهه بسهتگی دارد.
نتایج این آزمایش نیز نقهش مه ؤثر تنظهیم کننهده ههای رشهد گیاهی در پاسخ ریزنمونهها را مشخص نمود.
در ارتباط با اثر تنظه یمکننهده هها ی رشهد گیه اهی، نهوع ،
غلظ ت و نس بت هورم ونه ا در موفقی ت کش ت باف ت، تحقیقات متعددی انجام شده است. معمولا جههت شهاخه -زایی از هورمونهای سیتوکنینی استفاده میشود [26]. نهوع ریزنمونه، محی رشد و سهطوح هورمه ونههای داخلهی در القای شاخساره تهأثیر مهی گذارنهد و ایهن فاکتورهها باعه تفاوت در مشاهدات میشوند [15].
منبع ریزنمونه مورد استفاده، برای تعیین اندام و پتانسیل تولید مهم است که بهطور معنهی داری تحهت تهأثیر شهرای فیزیولوژیکی و فتوسنتزی گیاه والهد قهرار مهی گیهرد [12 و 22]. سن فیزیولوژیکی ریزنمونهها، نوع و اندازه ریزنمونه-ها از فاکتورهای دیگری اسهت کهه بهر تشهکیل انهدام هها ی درون شیشههه مههؤثر هسههتند [23]. در گیاهههان مختلههف از بخشهای هوایی گیاهان به عنوان ریزنمونهه اسهتفاده شهده است. به عنوان مثهال ، در کهور ).Capparis spinosa L( از ریزنمونه هیپوکوتیهل [6]، در گیهاه Benincasa hispida از کوتیلدن [16]، در گیاه نعناع فلفلی از ریزنمونه گره [25] و در گیاه پرسهیاوش )Ginkgi biloba( از ریزنمونهه مریسهتم انتهایی، برگ و دمبرگ [2] استفاده شده اسهت . در بررسهی تأثیر 4 ریزنمونه )مریستم انتهایی، گره، کوتیلدن و قطعهات بهرگ( در بهاززایی درون شیشهه ای بادرنجبویهه ) Mehissaofficinalis( گزارش نمودند که حداکثر درصد بهاززایی در ریزنمونه مریستم انتهایی )5/94 گیاهچه در هر ریزنمونه( و بیشترین میانگین باززایی در ریزنمونه گهره )9/34 گیاهچهه در هر ریزنمونه( مربوط به تیمار 22 میکرومول BA بود در حالی که ریزنمونه کوتیلدن و قطعات بهرگ بهاززایی نشهان ندادند [4].
بیش ترین ب اززایی از ریزنمون ه ن وک شاخسهاره و در محی حاوی غلظتها و ترکیبات مختلف تنظیمکنندهههای رشد بهدست آمهد )شهکل 5- الهف و ب.( در ایهن رابطهه ، محققین در آزمایشات خهود بهر روی اثهرات غلظهت ههای
مختلف Kinبر روی بهاززایی گیهاه زینتهی Matthiolaincana مشاهده کردند که بها افهزایش غلظهت Kin تعهداد و طههول شههاخههههای پههرآوری شههده افههزایش یافههت [8].
سیتوکینینها بر غالبیت انتهایی غلبه میکننهد ، باعه القها ی تعداد زیادی جوانه شاخه شده و باع از بین رفتن خهواب جوانههای جانبی میشوند. بنابراین انتخاب غلظت مناسهب تنظیمکننده رشد گیاهی، مرحله بحرانی در بهاززایی شهاخه است [11].
موقعیت ریزنمونه بر روی گیاه مادری بر روی رشهد و نمو مؤثر است و هرقدر از قسمت بالاتر گیاه ریزنمونه تهیه شود، احتمال موفقیت در کشت بافهت بیشهتر خواههد بهو د [1]. بنابراین احتمال میرود علهت عملکهرد موفقیهت آمیهز ریزنمونه نوک شاخساره نسبت به سایر ریزنمونههها همهین موضوع باشد. همچنین در محی شاهد )بدون تنظیمکننهده رش د( ب اززایی بس یار ک م مش اهده گردی د ک ه ای ن ام ر نشان دهنده اهمیهت سهیتوکینین هها در تحریه پهرآوری و تقسیم سلولی در ریزنمونههای کشت شده و تشکیل انهدام در بافتهای تیمار شده با سهیتوکینین اسهت . بهه طهورکلی ، تنظیم کننده رشهد Kin در تعهادل بها غلظهت ههای اکسهین ، ریزنمونهها را در جهت افزایش طول سهلول هها و درنتیجهه افزایش تولید شاخساره کامل پیش برده است [12]. بررسففی اثففرات غلظففت نمفف )MS( و تنظففیم–کننففده هففای رشففد IAA و IBA بففر ریشففهزایففی گیاهچههای باززایی شده
در تحقیق حاضر، اثر غلظت نمه در محه ی کشهت پایه ه MS و تیمار هورمونی IAA و IBA به منظور ارزیابی پاسخ گیاهچههای باززایی شده جهت ریشهزایهی انجهام گردیهد .
حدود چهار هفته بعد از قرار گرفتن گیاهچههای حاصل از باززایی در محی ریشهزایی، گیاهچههای ریشهدار شهده بها دقت از شیشهها خارج و ریشهه ههای القها ء شهده شهمارش شدند. نتایج تجزیه واریانس دادهها نشان داد که اثرات ساده و متقابل محی کشت و هورمون بر القای ریشهه در سهطح احتم ال ی درص د معن یدار ب ود )ج دول 6(. مقایس ه میانگین اثرات متقابل هورمون و محی بر القای ریشه نشان داد ک ه مح ی کش ت MS ح اوی 1/1 و 2/2 میکروم ول هورمون IBA با میهانگین 50/87 بیشهترین میهانگین القها ی ریشه را ایجاد کرد. میهانگین القها ی ریشهه ایجهاد شهده در محی کشت MS2/1 حاوی 1/1 میکرومول IBA، 50 بهود و در سایر تیمارها ریشهزایی مشاهده نگردید )شکلههای 5- ج و شکل 6(. ریزشاخههایی کهه در محهی کشهت بهدون اکس ین ق رار داده ش دند، ریش های ایج اد نکردن د. نت ایج مشابهی در کشت درونشیشهای گیاه بادرنجبویهه به هدسهت آمده است [13،4].
ریشهزایی بهوسیله عوامل مختلفی نظیر وجهو د تنطهیم -کنندههای رشد در محی، ترکیب نم های پایه، ژنوتیپ و شرای محیطی تحت تأثیر قرار میگیهرد . اکسهین هها نقهش مهمی در ریشهزایی دارند و بهرای بیشهتر گونهه هها وجهود اکسین بهرای انگیهزش ریشهه زایهی لازم اسهت [17 و 30].
اکسین مراحل پیچیده تشکیل ریشه جهانبی )Lateral( را از طریق تکرار تقسیم سلولی القاء میکند [16].
در تركیب با 5/0 میلیگرم بر لیتر IAA 6 هفته بعد از كشت، ب – گیاهچههای باززا شده 9 هفته بعد از كشت، ج – گیاهچههای ریشهدار شده در محیط MS حاوی 2/2 میکرومول IBA و د – گیاهچههای سازگار شده.
شکل 5 . مراحل كشت بافت: الف – جوانههای القا شده در محیط حاوی پنج میلیگرم بر لیتر Kin
جدول 6 . جدول تجزیه واریانس اثرات متقابل غلظت نمک در محیط كشت پایه MS و تیمار هورمونی بر میانگین القای ریشه گیاه بذرالبنج مشبک
منابع تغییرات درجه آزادی میانگین مربعات القا ریشه
7812/500 9270/833**
3437/500** |
1
3
3 |
× تیمار هورمونی | غلظت نم
تیمار هورمونی اثر متقابل غلظت نم |
59/524 | 21 | خطای آزمایشی |
**
** – اختلاف معنیدار در سطح احتمال 1 درصد
1/2
شکل 6. اثر محیطهای مختلف ریشهزایی بر میانگین القای ریشههای تولید شده در محیط كشتهای MS و MS حاوی غلظتهای مختلف IAA و IBA گیاه بذرالبنج مشبک
R1 = MS + 1.1µM IBA, R2 = MS + 2.2µM IBA, R3 = 1/2MS + 1.1µM IBA, R4 = 1/2MS + 2.2µM IBA, R5 = MS + 1.1µM IAA,
R6 = MS + 2.2µM IAA, R7 = 1/2MS + 1.1µM IAA, R8 = 1/2MS + 2.2 µM IAA
در کل ریشهه زایهی گیاهچهه ههای بهذرالبنج مشهب در محی MS و در حضور IBA بهتر از سایر تیمارها بود کهه این نتایج با نتایج حاصل از تحقیهق انجهام شهده در مهورد گی اه Curculigo latifolia مطابق ت دارد [11]. همچن ین دیگههر گزارشههات، ریشهههزایههی گیاهچههههههای ماریتیغههال )Silybum marianum( در محی MS حاوی 25/0 میله ی-گرم در لیتر IBA نشان میدهند [24.]
سازگاری
موفقیت هر دستورالعمل کشت بافت، بستگی به سهازگاری موفق گیاهچههای بهدست آمده از کشت درونشیشهه ای در ش رای گلخان ه و مزرع ه دارد [19]. در تحقی ق حاض ر، گیاهچههای بهدست آمده از کشت درونشیشهای کهه پهس از ریشهدار شدن به گلدانهای پلاسهتیکی بهرای سهازگاری منتقل شده بودند، پس از 10 روز با 90 درصد زندهمانی به شرای گلخانه منتقهل شهدند )شهکل 5- د.( درنتیجهه ، بها استفاده از تکنی کشت بافت و با ریزنمونههای جوانههای انتهایی در ی محی مغذی حاوی سهیتوکینین یها ترکیهب سیتوکینین و اکسین مناسب، میزان و سرعت تکثیهر شهاخه میتواند به میزان زیادی افزایش یابد.
منابع
- بههاقری ه و آزادی پ )1381( کشههت بافههت گیههاهی
)تکنی ها و آزمایشها.( چاپ اول، انتشارات دانشگاه مشهد. 154 .
- تولیت م، عبدلی م، مشکین م، سیگارودی ف و امیدی م )1387( بررسهههی کشهههت درونشیشههههای گیهههاه ژینکوبیلوب ا از طریههق کشههت باف ت ریزنمونههههههای مختلف. گیاهان دارویی. 32: 162-156.
- چلبیههان ف و مجههد ا )1383( بررسههی تغییههر میههزان آلکالوئیدهای تروپهان در مراحهل مختلهف رشهد گیهاه
Hyoscyamus reticulatus L. در شههرای طبیعههی و تأثیر تغییر عناصر و قند بر بیوسنتز این آلکالوئیهدها در کشت بافت آن. گیاهان دارویی. 10: 46-39.
- جنگجو خ )1391( بررسی فاکتورهای مؤثر در باززایی درونشیشه های بادرنجبویه ه )Melissa officinalis(.
دانشگاه ارومیه. ارومیه. پایاننامه کارشناسی ارشد.
- معاونی پ )1388( گیاهان دارویهی ، جلهد اول. چهاپ اول. انتشارات دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهر قهدس .
. 1129
- مههوافقی ع، حبیبههی ق و علههی اصههغرپور م )1387( باززایی گیاه دارویی کهور ).Capparis spinosa L( بها استفاده از کشت قطعهات هیپوکوتیهل . زیسهت شناسهی
ایران. 2)21(: 10-1
- وصال س و باقری ع )1382( عملیات کشت بافت ههای گیاهی. انتشارات آستان قدس رضوی. 200 .
- AhmadiHesar A, Kaviani B, Tarang A and BohlooliZanjani S (2011) Effect of different concentrations of etin on regeneration of ten weeks (Matthiolaincana(. Plant Omics. 4(5): 236-238.
- Arteca RN (1996) Plant growth substances principles and applications. Pensylvania University. 325P.
- Ashok K and Bashir JM (2010) In vitro propagation of a medicinal plant Portulaca grandiflora Agricultural Sciences. :)3(6 327-.033
- Babaei N, Abdullah N, Saleh G and Lee
Abdullah T (2014) An efficient in vitro plantlet regeneration from shoot tip cultures of Curculigo latifolia, a medicinal plant. The Scientific World. Pp. 1-.9
- Debergh PC and Maene LJ (1981) Ascheme for commercial propagation of ornamental plants by tissue culture. Scientia Horticulturae. :41 335-.543
- Oto G, Ozdemir H, Yaren B, Yetkin Y, Tas A and Tantitanir P (2013) Antinociceptive activity of methanol extract of Hyoscyamus reticulatus Phytomedicine and Clinical Therapeutics. Pp. 177-123.
- Read PE (1988) Stock plant influence micropropagation success. Acta. Horticulture. 226: 41-52.
- Rout G, Saxeena C, Samantaray S and Das P (1999) Rapid clonal propagation of Plumbago zeylanica Linn. Plant Growth Regulation. 28: 1-4.
- SamandariGikoo T, Elhami B and
Khosrowchahi M (2012) Effects of explants type, plant growth regulators and actived charcoal on direct organogenesis of Silybum marianum. Biotechnology. 11(37): 9023-9027.
- Sarwar S, Zia M, Riaz-ur R, Zarrin F and Riaz A (2009) In vitro direct regeneration in mint from different explants on half strength MS medium. Biotechnology. 8(18): 4667-4671.
- Sidhu S (2010) In vitro micropropagation of medicinal plants by tissue culture. The Plymouth Student. 4(1): 432-446.
- Singh Negi R, Chand Sharma K and Sharma M (2011) Micropropagation and anatomical comparision of in vivo and in vitro developed shoot and root in Cassia auriculata a medicinally important plant. Fundamental and Applied Life Sciences. 1(1): 21-29.
- Spiridon E (2010) Tissue Culture, somatic embryogenesis, micropropagation and biotransformation. :06 555-559.
- Venkatromalingam K and Ebbie MG (2011) An efficient in vitro culture method of shoot regeneration coramedicinaly important plant Mentha piperita. Plant Sciences. :01 1-.5
- Vuylasteker C, Dewaele S and Rambour S (1998) Auxin induced lateral root formation in Chicory. Annals Botany. :18 449-.454
ŞTEFĂNESCU C and Tamas M (2002) Tropane Alkaloid biosynthesis in tissue cultures of scopolia carniolica JACQ. Contribuţii Botanice. Pp. 155-164.
[دوشنبه 1399-10-08] [ 12:05:00 ب.ظ ]
|