2-7-1) پروستات……………………………………………………………………………………………………………………………………………11
3-7-1) -غدد پیازی پیشابراهی………………………………………………………………………………………………………………………..12
8-1) اسپرماتوژنز……………………….. ………………………………………………………………………………………………………………..12
اسپرماتوسیتوژنز…………………………………………………………………………………………………………………………………12 1-8-1)
2-8-1) میوز………………………………………………………………………………………………………………………………………………….13
3-8-1)اسپرمیوژنز…………………………………………………………………………………………………………………………………………..13
9-1)مورفولوژی اسپرم……………………………………………………………………………………………………………………………………14
1-9-1)سر اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………………………………..14
2-9-1) دم اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………………………………..15
10-1)ارزیابی مورفولوزی اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………16
11-1)تنظیم هورمونی اسپرماتوژنز…………………………………………………………………………………………………………………….16
12-1)ظرفیت یابی و واکنش آکروزومی اسپرماتوزوئیدها……………………………………………………………………………………..17
13-1)تستوسترون و سایر هورمون های جنسی نر……………………………………………………………………………………………….18
14-1) تنظیم ترشح تستوسترون………………………………………………………………………………………………………………………..19
15-1) آثار مختلف آندروژن ها……………………………………………………………………………………………………………………….19
16-1)تجزیه و دفع تستسترون………………………………………………………………………………………………………………………….20
17-1) -فعالیت های بیولوژیکی در تولید مثل……………………………………………………………………………………………………21
18-1) سیکل استروس……………………………………………………………………………………………………………………………………21
19-1) اوولاسیون……………………………………………………………………………………………………………………………………………21
20-1)حاملگی……………………………………………………………………………………………………………………………………………….22
21-1) دوره حاملگی……………………………………………………………………………………………………………………………………….22
22-1) سیکلوسپورین………………………………………………………………………………………………………………………………………22
23-1)تاریخچه وساختمان شیمیایی سیکلوسپورین- آ………………………………………………………………………………………….22
24-1) مکانیسم عمل سیکلوسپورینآ در بدن………………………………………………………………………………………………………24
25-1)کاربرد های بالینی و عوارض…………………………………………………………………………………………………………………..25
26-1) استرس اکسیداتیو و پیامدهای آن در دستگاه تولید مثلی نر…………………………………………………………………………25
آنتی اکسیدانت ها و نقش حفاظتی آنها در برابر استرس اکسیداتیو………………………………………………………………28 27-1)
28-1) آنزیم سوپراکسید دیسموتاز(SOD…………………………………………………………………………………………………………30
29-1)آنزیم کاتالاز…………………………………………………………………………………………………………………………………………31
30-1) آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز…………………………………………………………………………………………………………………….31
31-1) آنزیم گلوتاتیون ردوکتاز……………………………………………………………………………………………………………………….31
32-1) مکانیسمهای پاسخ سلولی به استرس……………………………………………………………………………………………………..31
1-32-1) ترمیم و باز سازی DNA………………………………………………………………………………………………………………..32
33-1) مسیرهای ترمیم DNA………………………………………………………………………………………………………………………..32
34-1) مکانیسم های دفاع آنتی اکسیدانتی………………………………………………………………………………………………………….33
35-1)زالزالک………………………………………………………………………………………………………………………………………………34
1-35-1) خصوصیات فیتوشیمیایی ………………………………………………………………………………………………………………..34
2-35-1) ویژگیهای داروشناختی………………………………………………………………………………………………………………….34
1-2-36-1) اثرات حفاظتی بر روی سیستم قلبی و عروقی………………………………………………………………………………. 33
2-2-35-1) خاصیت کاهندگی چربی خون……………………………………………………………………………………………………..35
3-2-35-1) اثرات آنتی اکسیدانتی………………………………………………………………………………………………………………….35
36-1)عصاره هسته انگور……………………………………………………………………………………………………………………………..36
37-1) تولیدمثل در موشهای صحرایی…………………………………………………………………………………………………………..38
1-37-1) بلوغ…………………………………………………………………………………………………………………………………………….38
2-37-1) رفتار تولیدمثلی…………………………………………………………………………………………………………………………….38
3-37-1) دستگاه تولیدمثلی موشهای صحرایی نر………………………………………………………………………………………….39
38-1) تولید جنین در شرایط In vitro………………………………………………………………………………………………………..41
39-1) ظرفیت پذیری اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………. 41
40-1) لقاح آزمایشگاهی(IVF)…………………………………………………………………………………………………………………..42
41-1) بر مطالعات انجام گرفته برروی داروی سیکلوپورین، عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور…………44
فصل دوم : مواد و روشها
1-2) مواد………………………………………………………………………………………………………………………………………………….46
2-2) وسایل و دستگاه ها…………………………………………………………………………………………………………………………….46
3-2) آماده سازی عصاره های آبی…………………………………………………………………………………………………………………47
1-3-2) تهیه عصاره هسته انگور……………………………………………………………………………………………………………………47
2-3-2) طرز تهیه عصاره زالزالک………………………………………………………………………………………………………………….48
4-2) گروه بندی حیوانات……………………………………………………………………………………………………………………………48
5-2) تعیین حیوانات و دوز موثر دارو……………………………………………………………………………………………………………48
6-2) گروه بندی حیوانات…………………………………………………………………………………………………………………………….49
7-2) برریس های بافت شناسی…………………………………………………………………………………………………………………….49
8-2) روش تهیه محلول ثبوتی فرمالین……………………………………………………………………………………………………………50
9-2) پاساژ بافتی………………………………………………………………………………………………………………………………………….50
1-9-2) آبگیری…………………………………………………………………………………………………………………………………………..50
2-9-2) شفاف سازی……………………………………………………………………………………………………………………………………50
3-9-2) نفوذ و آغشتگی……………………………………………………………………………………………………………………………….51
4-9-2) قالب گیری……………………………………………………………………………………………………………………………………..51
5-9-2) برش بافت و ثابت کردن مقاطع بافتی بر روی لام……………………………………………………………………………….. 52
6-9-2)طرز تهیه چسب آلبومین……………………………………………………………………………………………………………………..52
10-2) رنگ امیزی مقاطع بافتی……………………………………………………………………………………………………………………… 52
11-2) رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین……………………………………………………………………………………………………….53
1-11-2) طرز تهیه اسید الکل…………………………………………………………………………………………………………………………54
2-11-2) طرز تهیه رنگ ائوزین…………………………………………………………………………………………………………………….. 54
3-11-2) طرز تهیه رنگ هماتوکسیلین هاریس…………………………………………………………………………………………………..54
12-2) ارزیابی هیستو مورفومتریک بیضه…………………………………………………………………………………………………………..55
13-2) آماده سازی موش برای IVF ………………………………………………………………………………………………………………55
2-20-2) آماده سازی محیط کشت برای IVF …………………………………………………………………………………………..56
2-13-2) طرز تهیه محیط کشت mR1ECM……………………………………………………………………………………………56
3-13-2) تهیه اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………………………57
4-13-2) روش گرفتن تخمک بالغ و لقاح داخل آزمایشگاهی(IVF)…………………………………………………………….57
14-2) ارزیابی رشد جنین ها……………………………………………………………………………………………………………………..58
15-2) ارزیابی اسپرماتوژنز در بافت بیضه…………………………………………………………………………………………………….59
16-2) ارزیابی خصوصیات اسپرم ها……………………………………………………………………………………………………………59
1-16-2) نحوه استحصال اسپرم از اپیدیدم…………………………………………………………………………………………………..59
2-16-2) بررسی تحرک در اسپرماتوزوئیدها……………………………………………………………………………………………….60
3-16-2)شمارش اسپرمها………………………………………………………………………………………………………………………..60
17-2) ارزیابی قابلیت زنده ماندن و مورفولوژی اسپرمها ……………………………………………………………………………..60
۱8-2 ) بررسی وضعیت بلوغ هسته اسپرم: رنگ آمیزی آنیلین بلو (AB)………………………………………………………. 61
19-2) بررسی DNA شکسته و یا تک رشته ای: رنگ آمیزی آکریدین اورانژ (AO)…………………………………… 61
20-2) مطالعات هیستوشیمیایی بیضه………………………………………………………………………………………………………..62
1-20-2) رنگ آمیزی پریودیک اسید شیف (PAS)……………………………………………………………………………….62
2-20-2)رنگ آمیزی سودان بلک…………………………………………………………………………………………………………….62
3-20-2) بررسی هیستوشیمیایی فعالیت آنزیم الکالین فسفاتاز ……………………………………………………………………62
21-2) آنالیز و تحلیل داده ها………………………………………………………………………………………………………………….63
فصل سوم نتایج ویافته ها
1-3) نتایج حاصل از پارامترهای مختلف اسپرم……………………………………………………………………………………………64
1-1-3) نتایج حاصل از شمارش اسپرم در اپی دیدیم………………………………………………………………………………….64
2-1-3) نتایج حاصل از مطالعه میزان اسپرم زنده………………………………………………………………………………………..65
3-1-3) نتایج حاصل از شمارش اسپرم های نابالغ………………………………………………………………………………………66
4-1-3) نتایج حاصل از مطالعه کروماتین اسپرم………………………………………………………………………………………….67
2-3) نتایج حاصل از مطالعه پارامترهای مختلف لقاح (IVF)………………………………………………………………………70
1-2-3) نتایج حاصل از تعداد اووسیت های لقاح یافته در گروه های مختلف آزمایش…………………………………….70
2-2-3) نتایج حاصل از تعداد جنین های دو سلولی…………………………………………………………………………………….71
3-2-3) نتایج حاصل از تعداد بلاستوسیست……………………………………………………………………………………………….72
4-2-3)نتایج حاصل از تعداد جنین های ارست شده…………………………………………………………………………………….73
5-2-3) نتایج حاصل از تعداد جنین های تیپ 1………………………………………………………………………………………… 74
6-2-3)نتایج حاصل از جنین های تیپ 2……………………………………………………………………………………………………75
6-2-3) تنایج حاصل از تعداد جنین های تیپ 3………………………………………………………………………………………….76
4-3)نتایج بخش هیستوشیمیایی………………………………………………………………………………………………………………….80
1-4-3) نتایج مربوط به رنگ آمیزی PAS ……………………………………………………………………………………………….. 81
2-4-3)نتایج مربوط به رنگ آمیزی Sudan Black …………………………………………………………………………………..82
3-4-3) بررسی آلکالین فسفاتاز بافتی……………………………………………………………………………………………………………83
5-3) نتایج حاصل از هیستومورفومتری بیضه………………………………………………………………………………………………….84
1-5-3)نتایج حاصل از اندازه گیری قطرلوله های سمینیفر و ضخامت اپی تلیوم لوله های ………………………………….84
2-5-3) نتایج حاصل از اندازه گیری تعداد سلول های لیدیگ بیضه………………………………………………………..86
3-5-3) نتایج حاصل از اندازه گیری تعداد سلولهای لنفاوی تک هستهای………………………………………………87